Lactulosa tidak dapat dihidrolisis oleh enzim disaccharidase di usus kecil, sehingga hanya diabsorbsi dalam jumlah kecil. Lactulosa terdegradasi dalam usus besar oleh flora bakterial menjadi asam lemak rantai pendek, terutama menjadi asam laktat dan asam asetat, sehingga mengurangi pH kolon dan meningkatkan tekanan osmotik di lumen usus.